民國115年 高考三級 植物病理 植物病害防治學
第5題
某社區栽植的七里香上發生了文獻上查不到的新病害。植株主要出現全 株萎凋的現象，請問你會如何進行田間及實驗室的診斷作業？（20 分）
題目
某社區栽植的七里香上發生了文獻上查不到的新病害。植株主要出現全 株萎凋的現象，請問你會如何進行田間及實驗室的診斷作業？（20 分）
參考解答（AI 生成，非官方）
- 一、田間現場調查與紀錄：先確認發生範圍、發病率與分布型（點狀、行狀或全面），訪談農民栽培史、施肥、灌溉、除草劑使用、前作與苗木來源；繪製田區圖並拍照記錄萎凋、黃化、落葉及地際莖部褐化等病徵；檢查根冠縱切面是否有褐化、菌絲片、菌核或白色菌索，並排除缺水、淹水、鹽害、肥害、寒害與除草劑藥害等非生物因素。
- 二、採樣策略：於病健交界處採集根、根冠、莖基部與土壤，另採健康植株作對照；每區至少五至十株，分裝標示、低溫保存並儘速送檢；同時捕集媒介昆蟲（介殼蟲、粉蝨、飛蝨）並檢查根部線蟲。若懷疑植原體或病毒，應加採新梢與葉片。所有樣本須避免交叉污染，並保留部分組織供分子檢驗。
- 三、實驗室分離與鏡檢：組織以 70% 酒精與 1% 次氯酸鈉表面消毒後，置於 PDA、WA 或選擇性培養基（如 PARPH）於 25℃ 黑暗培養；觀察菌落形態、生長速率、孢子及特殊構造；細菌以 NA 分離並行革蘭氏染色；根部以貝曼漏斗法分離線蟲；必要時以光學或電子顯微鏡檢查病毒內含體與植原體。
- 四、分子與血清學鑑定：真菌以 ITS、TEF1-α、TUB2、RPB2 等多基因定序進行親緣分析；細菌以 16S rRNA 及特異性引子 PCR 鑑定；植原體以 16S rRNA 基因檢測；病毒以 ELISA 或 RT-PCR 檢測，必要時以 qPCR、LAMP 快速定量，並以電子顯微鏡觀察病毒粒子，以確認病原種類。
- 五、病原性測定與後續處理：依柯霍氏法則，將純化菌株以浸根、土壤灌注、莖部針接或孢子懸浮液噴施接種健康七里香苗木，置於適溫高濕環境觀察二至八週，確認與田間相同病徵後再分離；若形態與分子特徵均異於已知種，應以多基因 phylogeny 與形態描述發表新種。最後提出診斷報告與防治建議（清園、健康種苗、土壤消毒、藥劑與生物防治），並通報防檢機關持續監測。
AI 依官方試題文字產生的參考解答，非考選部公告答案，內容僅供備考參考。