民國115年 高考三級 食品衛生檢驗 食品微生物學
第2題
請分別說明「增殖培養(enrichment culture)」應用於菌種馴化或微生物 檢測的目的;另說明食物樣品檢測特定菌種時,使用「增殖培養檢測」 的步驟。(…
題目
請分別說明「增殖培養(enrichment culture)」應用於菌種馴化或微生物 檢測的目的;另說明食物樣品檢測特定菌種時,使用「增殖培養檢測」 的步驟。(25 分)
參考解答(AI 生成,非官方)
- 一、定義與基本原則:增殖培養(enrichment culture)係以液體培養基提供目標菌最適的生長條件,包括營養組成、溫度、pH、氣體環境及選擇性抑制劑,使目標菌在混合菌相中相對數量增加,便於後續分離與鑑定。其核心目的有二:一為菌種馴化(adaptation),二為微生物檢測(detection)。
- 二、應用於菌種馴化的目的:工業發酵菌株如乳酸菌、酵母菌、醋酸菌之選育,可將菌株連續繼代於含漸增濃度基質、酸、鹽、膽鹽或乙醇的培養基中,篩選耐性強、產物生成速率高者;環境微生物方面,可用於農藥分解菌或重金屬耐受菌之馴化,提高其降解效率,縮短處理時間。
- 三、應用於檢測的目的:食品中病原菌含量常低於每公克十個菌落形成單位,且加工過程會造成細胞損傷(injured cells),直接塗佈易產生偽陰性。增殖培養可修復受損細胞(resuscitation)、稀釋食品中抑制性成分、放大菌數至可檢出範圍,從而提高檢出率與靈敏度。
- 四、檢測步驟:(1)取樣與均質,取二十五公克檢體加入二百二十五毫升稀釋液;(2)前增殖或非選擇性增殖,如緩衝蛋白腖水(BPW)修復細胞;(3)選擇性增殖,如以 RV 或 TT 培養基增殖沙門氏菌、以改良 EC 培養基增殖大腸桿菌 O157:H7;(4)次培養於選擇性固態培養基,如 XLD、HE、SMAC 平板;(5)挑取可疑菌落,進行生化試驗、血清學凝集、酵素免疫分析或聚合酶鏈反應確認;(6)依檢出或未檢出判讀並出具報告。
- 五、限制與注意事項:增殖時間過長易使背景菌過度生長而競爭抑制目標菌;培養基批次差異與溫度偏差會影響再現性;處於不可培養狀態(VBNC)之菌體無法增殖;若目的為定量,不宜採增殖培養,應以直接計數法或最確數法為之。
AI 依官方試題文字產生的參考解答,非考選部公告答案,內容僅供備考參考。