在以桑格定序法（Sanger sequencing）進行體細胞基因突變（somatic mutation）分析時，如果待測樣品的異質性（heterogeneit…

題目

在以桑格定序法（Sanger sequencing）進行體細胞基因突變（somatic mutation）分析時，如果待測樣品的異質性（heterogeneity）很高的時候，下列何者需要謹慎評估？ A. 抽核酸的方法 B. 定序的引子（primer）設計 C. 訊號基準線（baseline）的隔斷值（cut-off value） D. 環境的溫濕度

官方答案

• 答案：C. 訊號基準線（baseline）的隔斷值（cut-off value）

解析

桑格定序的訊號是族群平均，體細胞突變若異質性很高（突變 allele 比例很低），突變峰會非常低，甚至與背景雜訊、定序化學本身造成的 baseline 假訊號混在一起。此時最關鍵的是設定合理的訊號基準線與隔斷值（cut-off value），才能區分真正的低比例突變與雜訊，避免偽陽性或偽陰性。抽核酸方法與引子設計雖會影響整體品質，但不是「異質性高」時特有的判讀關鍵；溫濕度屬於一般環境管控，對判讀門檻影響更間接。故選 C。

AI 參考解析（推得答案已與官方答案比對一致），非官方公告內容，僅供備考參考。

官方資料

• 官方試題 PDF
• 官方答案 PDF

答案以考選部公告之測驗式試題標準答案 PDF 為準。