分子檢驗用於核酸擴增的引子（primer），通常對於序列有許多的考量通則，才能符合特異性需求；避免偽陽性發生的做法，下列何者錯誤？

題目

分子檢驗用於核酸擴增的引子（primer），通常對於序列有許多的考量通則，才能符合特異性需求；避免偽陽性發生的做法，下列何者錯誤？ A. 引子的GC含量應控制在30～70%間 B. 應該避免形成引子雙體（primer-dimer） C. 為提高特異性，primers最好出現連續4個G D. real time PCR的放大片段不要超過400bp

官方答案

• 答案：C. 為提高特異性，primers最好出現連續4個G

解析

引子設計應避免連續 4 個以上的相同鹼基，尤其連續 G 會形成 G-四股結構（G-quadruplex），造成非特異性擴增與偽陽性，故 C 錯誤。一般建議 GC 含量控制在 30～70%、避免引子雙體與髮夾結構，real-time PCR 的擴增片段宜短（約 50～400 bp）以提高擴增效率。故選 C。

AI 參考解析（推得答案已與官方答案比對一致），非官方公告內容，僅供備考參考。

官方資料

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