下列那個因素會影響到聚合酶連鎖反應產物的特異性（specificity）？

題目

下列那個因素會影響到聚合酶連鎖反應產物的特異性（specificity）？ A. DNA雙股分離（denaturation）的溫度 B. 引子（primer）延伸（Extension）的溫度 C. 引子的序列 D. 反應循環數

官方答案

• 答案：C. 引子的序列

解析

PCR的特異性取決於引子與標的序列的互補程度，包括引子序列本身、GC含量、3'端配對情形及是否會形成二聚體或髮夾結構，故引子序列是決定特異性的核心因素。變性溫度主要影響雙股DNA解開是否完全，延伸溫度影響Taq聚合酶的活性與合成速率，循環數則影響產量與靈敏度，三者對特異性的影響遠不及引子設計。附帶一提，黏合（annealing）溫度也會影響特異性，但選項中並未列出。

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官方資料

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