致癌基因的基因擴增（amplification）常是造成癌症的重要因素，下列何種方法最不適合應用於檢驗「基因擴增」？

題目

致癌基因的基因擴增（amplification）常是造成癌症的重要因素，下列何種方法最不適合應用於檢驗「基因擴增」？ A. 螢光原位雜交法（FISH） B. 即時定量聚合酶連鎖反應（Real-time Q-PCR） C. 次世代定序（Next-generation sequencing, NGS） D. 桑格定序法 （Sanger sequencing）

官方答案

• 答案：D. 桑格定序法 （Sanger sequencing）

解析

基因擴增是指特定基因拷貝數增加，檢驗重點在「量」的變化。FISH 可用基因探針計數螢光訊號數目；即時定量 PCR 可比較目標基因與參考基因的相對量；NGS 可藉由 reads 深度（read depth）推算拷貝數，三者都適合。桑格定序法主要用於確定一段 DNA 的鹼基序列，雖能偵測點突變，但訊號來自大量擴增後的產物，無法反映原始檢體中的基因拷貝數，因此最不適合，答案為 D。

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官方資料

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