關於Sanger sequencing的敘述，下列何者最不適當？

題目

關於Sanger sequencing的敘述，下列何者最不適當？ A. 原理是雙去氧核苷酸鏈中止法（dideoxynucleotide chain termination） B. 所使用的核苷酸包括雙去氧核苷酸與去氧核苷酸 C. 可以用四種螢光分別標定不同的雙去氧核苷酸 D. 定序引子應設計在變異點前5 bp左右，以利判讀

官方答案

• 答案：D. 定序引子應設計在變異點前5 bp左右，以利判讀

解析

Sanger定序（雙去氧核苷酸鏈中止法）原理是以ddNTP隨機終止延長中的DNA鏈，反應同時加入dNTP與帶四種不同螢光標記的ddNTP，經電泳分離後依螢光判讀序列（A、B、C皆正確）。定序引子應與待分析區域保持適當距離，一般至少50～100 bp以上，因靠近引子端訊號品質較差、波峰重疊不易判讀；若將引子設在變異點前僅5 bp，變異波峰會落在低品質區而難以正確判讀。故D最不適當。

AI 參考解析（推得答案已與官方答案比對一致），非官方公告內容，僅供備考參考。

官方資料

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