關於目前臨床上較常使用的兩個次世代定序平台的敘述，下列何者最不適當？

題目

關於目前臨床上較常使用的兩個次世代定序平台的敘述，下列何者最不適當？ A. Illumina定序平台主要以橋式PCR（bridge PCR）的方式來進行增幅 B. Illumina的可逆性中斷子定序（reversible terminator-based sequencing）是利用帶有不同顏色螢光標記的可逆性中斷子（reversible terminator）來進行反應 C. 賽默飛世爾（ThermoFisher）公司的Ion Torrent平台是用乳化PCR（emulsion PCR）來擴增核酸片段 D. Ion Torrent所使用的半導體定序技術是偵測DNA聚合反應時產生之焦磷酸根離子造成pH值的變化

官方答案

• 答案：D. Ion Torrent所使用的半導體定序技術是偵測DNA聚合反應時產生之焦磷酸根離子造成pH值的變化

解析

Illumina平台確以橋式PCR（bridge PCR）於flow cell上叢集增幅，並使用帶四色螢光的可逆性中斷子逐鹼基定序（A、B正確）；Ion Torrent則以乳化PCR在離子球（ISP）上增幅（C正確）。關鍵在Ion Torrent半導體技術偵測的是核苷酸聚合時釋出的質子（H⁺）造成pH下降、由ISFET感測；『焦磷酸根（PPi）』是Roche 454焦磷酸定序釋放並被螢光酵素偵測的物質，非Ion Torrent原理。故D最不適當。

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官方資料

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