關於 nested PCR 與 PCR-sequence specific primer（PCR-SSP）的敘述，下列何者最不正確？

題目

關於 nested PCR 與 PCR-sequence specific primer（PCR-SSP）的敘述，下列何者最不正確？ A. PCR-SSP 所使用的Taq DNA 聚合酶，應不具有3'端至5'端外切酶（exonuclease）活性 B. nested PCR 可以降低產物的錯誤率 C. 臨床上，PCR-SSP 常用於多樣性基因的分型 D. nested PCR 反應在執行時，需先將RNA 反轉錄成cDNA

官方答案

• 答案：D. nested PCR 反應在執行時，需先將RNA 反轉錄成cDNA

解析

正確答案為 D。nested PCR 是針對 DNA 模板，以兩組引子先外擴增、再以內引子二次擴增以提高特異性，並不必然需要將 RNA 反轉錄為 cDNA；僅當起始材料為 RNA 時才做 RT，故 D 之「需先將 RNA 反轉錄成 cDNA」敘述錯誤，最不正確。A 正確：PCR-SSP 使用不具 3'→5' 外切酶（proofreading）活性的 Taq，使錯配的 3' 端無法有效延伸以區分對偶基因。B 尚可：nested PCR 可減少非特異性產物。C 正確：PCR-SSP 廣用於 HLA 等多型性基因分型。

AI 參考解析（推得答案已與官方答案比對一致），非官方公告內容，僅供備考參考。

官方資料

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