有關即時聚合酶鏈鎖反應（real-time PCR）的敘述，下列何者最適當？

題目

有關即時聚合酶鏈鎖反應（real-time PCR）的敘述，下列何者最適當？ A. SYBR green 系統原理是利用引子對（primer sets）結合病毒自身的單股與雙股基因 B. 當Tm 值越高代表病毒濃度越低 C. PCR 跑35 cycles 時產物放大2×35 倍 D. TaqMan 系統中的DNA polymerase 具有exonuclease 活性

官方答案

• 答案：D. TaqMan 系統中的DNA polymerase 具有exonuclease 活性

解析

TaqMan 探針兩端帶有螢光與淬滅劑，PCR 延伸時利用 Taq DNA polymerase 的 5'→3' exonuclease 活性切斷探針，使螢光游離而訊號增加，因此 D 正確。A 錯在 SYBR green 是嵌入雙股 DNA 的小分子，不是引子對結合病毒基因。B 的 Tm 主要取決於產物序列、GC 含量與長度，不能用來判定病毒濃度；濃度主要由 Ct 值反映。C 的理論增幅是 2 的 35 次方，不是 2×35，且實際會受擴增效率與平台期影響。

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官方資料

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