關於PCR、RT-PCR 及nested PCR 的敘述，下列何者最不適當？

題目

關於PCR、RT-PCR 及nested PCR 的敘述，下列何者最不適當？ A. RT-PCR 和PCR 的主要差異是所使用的模板分別是RNA 與DNA B. 巢式聚合酶連鎖反應（nested PCR）和RT-PCR 都是經過兩階段的PCR 反應 C. 在RT-PCR 反應中可以設計加入螢光物質或螢光探針（probe），利用螢光訊號的偵測來判斷結果 D. 這三種技術都可以使用瓊脂凝膠電泳分析結果

官方答案

• 答案：B. 巢式聚合酶連鎖反應（nested PCR）和RT-PCR 都是經過兩階段的PCR 反應

解析

Nested PCR 是使用兩組引子進行兩回合連續的聚合酶連鎖反應，第一回合的產物作為第二回合的模板，以提高專一性與靈敏度；但 RT-PCR 是先以反轉錄酶把 RNA 轉成 cDNA，再進行一次 PCR 擴增，屬於「反轉錄＋一次 PCR」，並非兩階段 PCR，因此 B 的敘述最不適當。A 正確描述兩者模板分別為 RNA 與 DNA；C 所述即 real-time 螢光偵測的應用；D 三種技術的產物皆可用瓊脂凝膠電泳依片段大小分析。

AI 參考解析（推得答案已與官方答案比對一致），非官方公告內容，僅供備考參考。

官方資料

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