關於PCR-ARMS 技術的敘述，下列何者最不適當？

題目

關於PCR-ARMS 技術的敘述，下列何者最不適當？ A. 變異點設計在引子的5'端核苷酸 B. 此方法僅限於檢測已知的變異點 C. 藉由引子的設計，可使野生型與變異型之產物長度不同 D. 產物可以利用凝膠（agarose）或聚丙烯醯胺凝膠（polyacrylamide gel）分析

官方答案

• 答案：A. 變異點設計在引子的5'端核苷酸

解析

PCR-ARMS（amplification refractory mutation system）是利用對偶基因特異性引子：把變異點設計在引子的 3' 端最後一個核苷酸。若模板與引子 3' 端完全互補，Taq 聚合酶才能延伸；若 3' 端有錯配，因 Taq 缺乏 3'→5' 校正外切酶活性，延伸便受阻，因此突變型可被選擇性放大。所以 A 說「設計在 5' 端」最不適當。B 正確，必須先知道變異點序列才能設計引子；C 正確，可搭配不同長度的引子使野生型與突變型產物大小不同；D 正確，產物可用瓊脂糖或聚丙烯醯胺凝膠分析。故選 A。

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官方資料

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