有關PCR 的反應條件中，下列何者最不會造成非特異性產物的增加？

題目

有關PCR 的反應條件中，下列何者最不會造成非特異性產物的增加？ A. 增加循環次數 B. 增加鎂離子濃度 C. 降低annealing 溫度 D. 降低dNTP 濃度

官方答案

• 答案：D. 降低dNTP 濃度

解析

降低dNTP濃度會減少PCR所需受質，通常使擴增效率與產量下降，並不會促進引子與非目標序列的錯配結合，因此最不會增加非特異性產物。增加循環次數會累積非特異性產物；提高鎂離子濃度會穩定引子—模板配對並增進Taq活性，降低專一性；降低annealing溫度則容許較多錯配，均易產生非特異性條帶。

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官方資料

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