民國115年 普通考試 食品衛生檢驗 食品檢驗分析與化學概要
第3題
衛生福利部食品藥物管理署有一個建議方法，使用高效能液相層析法 （HPLC），分析膠囊及錠狀食品中thiamine、riboflavin、nicotinic ac…
題目
衛生福利部食品藥物管理署有一個建議方法，使用高效能液相層析法 （HPLC），分析膠囊及錠狀食品中thiamine、riboflavin、nicotinic acid、 nicotinamide、pantothenic acid、pyridoxine、folic acid、calcium L-5- methyltetrahydrofolate 及ascorbic acid 共九項化合物，所使用的管柱為C18 烷基管柱，流洗液使用酸性磷酸緩衝水溶液與乙腈，使用光二極體陣列檢 出器。請問此方法所檢測的化合物有何重要性？是否可以依層析之流洗 順序推測化合物的極性？檢測器如何鑑別化合物的正確性？（25 分）
參考解答（AI 生成，非官方）
- 一、重要性：九項多為水溶性維生素，thiamine（B1）為TPP、riboflavin（B2）為FMN/FAD、nicotinic acid與nicotinamide為NAD/NADP、pantothenic acid為CoA、pyridoxine（B6）為PLP、folic acid與5-MTHF參與單碳轉移、ascorbic acid為抗氧化劑及膠原蛋白羥化輔因子。
- 二、方法：C18逆相管柱、酸性磷酸緩衝液與乙腈梯度流洗，PDA偵測。酸性pH可質子化酸性官能基、抑制矽醇解離、改善峰形；不同維生素吸收波長差異大，宜多波長或全光譜擷取。
- 三、流洗順序與極性：逆相層析中，極性較高、疏水性較低者通常較早流出，故順序可作極性初步參考；但滯留受pKa、電荷、離子對、梯度、管柱批號與死體積影響，不能單憑順序斷定極性。
- 四、偵測器：光二極體陣列檢出器（DAD/PDA）可同時記錄190～800 nm吸收光譜，依各化合物特徵吸收峰與滯留時間鑑別；並以波峰純度、光譜比對及多波長訊號輔助，避免共流出干擾。
- 五、確認：以標準品比對滯留時間與光譜、添加回收、空白與檢量線查核；必要時以質譜或不同管柱再確認。DAD對同吸收光譜的共流出物鑑別力有限，不能視為絕對確認。
AI 依官方試題文字產生的參考解答，非考選部公告答案，內容僅供備考參考。