設計PCR條件時，引子（primer）黏合到DNA 模板（annealing）的溫度需要被優化。下列何者與決定annealing反應之最適溫度最無關？

題目

設計PCR條件時，引子（primer）黏合到DNA 模板（annealing）的溫度需要被優化。下列何者與決定annealing反應之最適溫度最無關？ A. PCR緩衝液之鹽類濃度 B. 引子的GC content C. PCR產物的片段長度 D. 引子有mismatches的序列

官方答案

• 答案：C. PCR產物的片段長度

解析

C。PCR 的 annealing 溫度主要取決於引子本身的特性，包括長度、GC 含量、序列互補性與 mismatch 數目，以及緩衝液的鹽類濃度；鹽濃度會影響雙股配對穩定度，mismatch 會降低 Tm。PCR 產物長度主要影響 extension 時間與聚合酶選擇，不會決定引子黏合溫度。故選 C。

AI 參考解析（推得答案已與官方答案比對一致），非官方公告內容，僅供備考參考。

官方資料

• 官方試題 PDF
• 官方答案 PDF

答案以考選部公告之測驗式試題標準答案 PDF 為準。