有關化學切割錯誤的鹼基（chemical cleavage of mismatch duplexes, CCM）檢驗方法，下列敘述何者最不適當？

題目

有關化學切割錯誤的鹼基（chemical cleavage of mismatch duplexes, CCM）檢驗方法，下列敘述何者最不適當？ A. 可以有效偵測點突變（point mutation） B. 由切割產生的片段大小可定位出突變點的位置 C. 利用一對具有螢光標示的引子（primers）進行PCR，將變異的與野生型的DNA片段放大 D. 可以使用非變性瓊脂凝膠電泳（non-denaturing agarose gel electrophoresis）分析

官方答案

• 答案：D. 可以使用非變性瓊脂凝膠電泳（non-denaturing agarose gel electrophoresis）分析

解析

CCM 先以帶螢光標示的引子進行 PCR，分別放大檢體與野生型 DNA，混合雜交成異源雙股；mismatch 處被化學試劑（如羥胺、四氧化鋨）修飾後，再以哌啶切割。切割片段經變性聚丙烯醯胺凝膠電泳分離，依片段長度即可定位突變點，故可偵測並定位點突變。切割片段短、彼此差異僅數個鹼基，須高解析度的變性膠才分得開，非變性瓊脂膠無法勝任，因此 D 最不適當。

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官方資料

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