下列那一種方法在進行核酸分子拷貝數（copy number）定量檢驗時，不需要製作標準曲線或與實驗控制組進行相對定量？

題目

下列那一種方法在進行核酸分子拷貝數（copy number）定量檢驗時，不需要製作標準曲線或與實驗控制組進行相對定量？ A. 即時定量聚合酶鏈鎖反應（real-time quantitative PCR） B. 多重連接依賴性探針擴增法（multiplex ligation-dependent probe amplification, MLPA） C. 微陣列核酸晶片（microarray chip） D. 數位化聚合酶鏈鎖反應（digital PCR）

官方答案

• 答案：D. 數位化聚合酶鏈鎖反應（digital PCR）

解析

答案D。數位化聚合酶鏈鎖反應（digital PCR, dPCR）是將樣本極度稀釋後分配至數以萬計的微滴或微孔中，使多數反應單元含0或1個模板分子，經PCR後依「陽性/陰性」端點讀取，再以泊松分布（Poisson distribution）直接計算出絕對拷貝數，故不需標準曲線，亦不需與控制組做相對定量。A即時定量PCR（qPCR）須以標準品建立標準曲線，或以前處理基因做ΔΔCt相對定量。B MLPA與C微陣列皆需與對照或參考樣本比較來推算相對拷貝數變化。因此唯獨dPCR可絕對定量。

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官方資料

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