關於次世代定序及傳統桑格定序的方法之敘述，下列何者最正確？

題目

關於次世代定序及傳統桑格定序的方法之敘述，下列何者最正確？ A. 兩者皆需建立文庫（library） B. 就單一片段而言，桑格定序讀長較次世代定序長 C. 就每個鹼基而言，次世代定序費用較桑格定序高 D. 就資料分析而言，桑格定序較次世代定序複雜

官方答案

• 答案：B. 就單一片段而言，桑格定序讀長較次世代定序長

解析

桑格定序（毛細管電泳）單次讀長可達 800–1,000 bp，遠長於主流二代定序平台（Illumina 150–300 bp，Ion Torrent 200–400 bp），故針對單一片段桑格讀長優勢明顯。選項 A 錯誤：桑格定序不需建立文庫，直接以單一片段為模板進行循環定序；二代定序必須將 DNA 打斷、加接接頭建立文庫。選項 C 錯誤：二代定序大規模平行化使每鹼基成本極低（約 $0.001/Mb），桑格定序每鹼基成本高得多。選項 D 錯誤：二代定序產生海量短片段需經比對、組裝、變異呼叫等複雜生物資訊流程；桑格定序僅需單序列品質修剪與比對，分析相對簡單。

AI 參考解析（推得答案已與官方答案比對一致），非官方公告內容，僅供備考參考。

官方資料

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